| 產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào)和規(guī)格 | 產(chǎn)品說(shuō)明書 | 價(jià)格 | |
| GST pull-down試劑盒 | FI8804,20/40次 | | ||
輝駿生物的GST pull-down試劑盒能夠高效調(diào)取GST融合蛋白或His融合蛋白在各類樣本中的互作蛋白。
在GST
pull-down實(shí)驗(yàn)前,先通過(guò)基因工程技術(shù)手段將目標(biāo)基因連入帶有GST標(biāo)簽的原核表達(dá)載體中,并導(dǎo)入大腸桿菌中進(jìn)行原核表達(dá)。之后,GST融合蛋白通過(guò)GTH(
Glutathione)樹脂純化。最后,加入樣本裂解液孵育,樣本中與GST融合蛋白有相互作用的蛋白便可被吸附而分離。分離的蛋白產(chǎn)物既可以用Western blot檢測(cè)已知蛋白,也可以用質(zhì)譜(LC-MS/MS)鑒定未知蛋白。
蛋白-蛋白間的相互作用是蛋白質(zhì)發(fā)揮生物學(xué)功能的主要模式,蛋白質(zhì)會(huì)通過(guò)結(jié)合不同的伙伴來(lái)行駛不同的功能,形成復(fù)雜的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)。以下列舉了可應(yīng)用蛋白 GST pull down試劑盒的幾個(gè)研究方向或研究領(lǐng)域:
1. 確定2個(gè)蛋白是否具有直接相互作用;
2. 確定蛋白之間結(jié)合的結(jié)構(gòu)域;
3. 病毒、細(xì)菌等病原體侵染宿主細(xì)胞的機(jī)制;
4. 酶和底物的作用機(jī)制;
5. 蛋白調(diào)控復(fù)合體的研究。
| 試劑名稱 | 體積(20 Tests) | 體積(40 Tests) | 保存條件 |
GST標(biāo)簽純化樹脂 | 950 μL | 1.9 mL | 4 ℃ |
| 裂解緩沖液 | 24 mL | 48 mL | 4 ℃ |
| 漂洗液 | 70 mL | 140 mL | 4 ℃ |
| 洗脫緩沖液 | 1.1 mL | 2.2 mL | 4 ℃ |
| 增強(qiáng)型蛋白酶抑制劑 | 600 μL | 1.2 mL | -20 ℃ |
| 10mL 離心管 | 1個(gè) | 1個(gè) | —— |
1、調(diào)取效率高:融合蛋白與樹脂親和力強(qiáng),可以高效純化目標(biāo)蛋白及其互作蛋白;
2、適用范圍廣:優(yōu)化的裂解液配方適用于動(dòng)物、植物組織、微生物等各類型組織和細(xì)胞樣本;
3、洗脫液適配后續(xù)Western Blot及質(zhì)譜(LC-MS/MS)實(shí)驗(yàn)。
4、操作簡(jiǎn)便,耗時(shí)短,適用于初學(xué)者。

1. 通過(guò)原核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)帶有GST標(biāo)簽的融合蛋白;
2. 在細(xì)菌上清液中加入GST標(biāo)簽親和純化樹脂,4 ℃孵育2 小時(shí);
3. 將待測(cè)樣本裂解液加入上述體系中,4 ℃孵育過(guò)夜;
4. 漂洗、洗脫得到目標(biāo)蛋白及其互作蛋白復(fù)合物。

GST pull down WB結(jié)果圖(陽(yáng)性)
GST Pull-down MS:Western blot檢測(cè)圖

蛋白pull-down MS:質(zhì)譜檢索表格(部分展示)
1. TIMELESS Promotes LUAD Growth via Suppressing Transferrin-Mediated Ferroptosis and Reprograms the Tumor Microenvironment against Anti-PD-1 Immunotherapy. 2026. Cancer Commun. 1區(qū), IF=24.9.
2. NPM3 functions as a lactyltransferase to promote necroptosis in male diabetic cardiomyopathy mice models via FASN transcription modulation. 2026. Nature Communications. 1區(qū), IF=15.7.
3. DSS1 inhibits autophagy to activate epithelial-mesenchymal transition in a pro-metastatic niche of renal cell carcinoma. 2025. Nature Communications. 1區(qū), IF=15.7.
4. A GYS2/p53 Negative Feedback Loop Restricts Tumor Growth in HBV-Related Hepatocellular Carcinoma. 2018. Cancer Research. 1區(qū), IF=11.2.
5. NOD2 reduces the chemoresistance of melanoma by inhibiting the TYMS/PLK1 signaling axis. 2024. Cell Death Dis. 1區(qū), IF=9.6.
6. Flot2 acts as a novel mediator of podocyte injury in proteinuric kidney disease. 2023. Int J Biol Sci. 1區(qū), IF=9.2.
7. Hepatitis B virus X protein promotes vimentin expression via LIM and SH3 domain protein 1 to facilitate epithelial-mesenchymal transition and hepatocarcinogenesis. Cell. 2021. Commun Signal. 2區(qū), IF=8.4.
8. A positive feedback loop between ZEB2 and ACSL4 regulates lipid metabolism to promote breast cancer metastasis. 2023. eLife. 1區(qū), IF=6.4.
輝駿實(shí)力


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