進行 Input 樣本制備時,擔憂蛋白降解、蛋白濃度不足等問題?其核心關(guān)鍵在于樣本裂解效率與蛋白保護措施的精準把控!輝駿生物 Input 樣本制備全流程視頻實操,全程標準化演示,有效規(guī)避實驗誤區(qū),保障樣本制備質(zhì)量。
實驗提示:
1?? 裂解液配制(加入適量蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,抑制蛋白降解,保護蛋白活性); 2?? 樣本裂解(根據(jù)樣本類型選擇超聲裂解或4°轉(zhuǎn)盤裂解,超聲時注意冰浴降溫,避免過熱損傷蛋白,裂解至樣本澄清無沉淀); 3?? 離心去上清(4°高速離心,收集上清液,去除細胞碎片、沉淀等雜質(zhì),上清液即為input樣本,避免沉淀干擾后續(xù)結(jié)合實驗)。
若Input檢測不到目標蛋白/待測蛋白,或檢測到的條帶微弱,可能是以下原因+解決方案? ① IP抗體親和力不足(常見原因):抗體無法有效結(jié)合抗原,導致檢測不到目標信號,這種情況直接更換IP抗體即可; ② 目標蛋白表達量低:可通過增加蛋白上樣量,提升蛋白檢測濃度或者是通過轉(zhuǎn)染帶標簽的過表達質(zhì)粒,提高目標蛋白的表達量。
若您在免疫沉淀(IP)實驗過程中遭遇抗體輕重鏈污染問題,輝駿生物科可為您提供專業(yè)解決方案:
① 標簽Co-IP實驗:推薦選用輝駿生物標簽納米抗體磁珠,涵蓋 Flag、HA、V5、GFP、RFP 等多種可選標簽,可特異性結(jié)合目標標簽,有效規(guī)避抗體輕重鏈污染
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 說明 |
FI8201 | 徹底消除抗體輕重鏈污染 | |
FI8202 | ||
FI8203 | ||
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FI8206 |
② 內(nèi)源Co-IP實驗:建議選用 IP專用二抗,通過特異性篩選設(shè)計,顯著降低輕重鏈干擾,保障實驗結(jié)果準確性。
廣州輝駿生物科技股份有限公司(Fitgene)成立于2011年,超15年科研服務經(jīng)驗,專業(yè)提供蛋白(抗體)和互作實驗服務,包括蛋白質(zhì)譜檢測、蛋白/RNA/DNA/化合物等分子間相互作用檢測、抗體穩(wěn)定表達株構(gòu)建、基因敲除和過表達細胞株構(gòu)建等;同時還研發(fā)了納米抗體磁珠、IP專用二抗、互作試劑盒、標簽抗體等科研產(chǎn)品。
公司自有分子、細胞和蛋白等實驗平臺,服務經(jīng)驗豐富,保證結(jié)果真實、可靠!我們不僅會提供專業(yè)的售前方案建議、而且售后技術(shù)支持將一直保持到文章發(fā)表,確保您安心進行下游實驗及投稿。
目前,客戶已在Signal Transduction and Targeted Therapy(IF: 52.7)、Journal of Hematology & Oncology(IF: 40.4)、European Heart Journal (IF: 35.7)、Molecular Cancer(IF: 33.9)、Cell Discovery (IF: 33.5)、Nature Methods(IF: 32.1)等高水平期刊成功發(fā)表大量高分文章。

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